低鐵飼料飼喂建立的缺鐵性貧血大鼠模型

(1)復(fù)制方法  ①飼料組分除鐵處理：先用去離子水配制1％的EDTA-2Na溶液，然后用鹽酸調(diào)節(jié)溶液的pH值為1～2(以保留其他離子)；按飼料：浸泡液=1kg：1.5L的比例浸泡飼料組分，放置于小型厚質(zhì)塑料袋中，每浸泡24h(中途攪拌1～2次)后，換上新的浸泡液，對(duì)浸出液測(cè)定其總含鐵量，直至浸出液的總含鐵量小于0.1mg/L，再用新的浸泡液浸泡24h后結(jié)束浸泡。將浸泡好了的酪蛋白、玉米淀粉分別裝于去除鐵處理過的自制的三層厚密棉布袋中，用針線手工封口后在家用滾筒式脫水機(jī)內(nèi)脫水，然后在溫度為80～85℃的電熱式烘箱內(nèi)連袋烘烤，累計(jì)烘烤72～96h即可烘干。在浸泡、脫水、烘干過程中均注意要防塵及接觸鐵器。經(jīng)除鐵處理后酪蛋白、玉米淀粉含鐵量分別為20.12，6.18μg/g。②低、中、高鐵飼料的配制：用已經(jīng)過去鐵處理的酪蛋白和玉米淀粉按比例與其他組分混合成為低鐵飼料，將未經(jīng)去鐵處理過的酪蛋白和玉米淀粉與其他組分按比例混合成為中鐵飼料，在中鐵飼料基礎(chǔ)上再加入含鐵量為30μg/g的枸櫞酸鐵作為高鐵飼料，經(jīng)測(cè)定低、中、高鐵飼料含鐵量分別為8.77μg/g、40.30μg/g、71.27μg/g。③模型建立：體重約為150g的雄性SD大鼠，均飼養(yǎng)于不銹鋼籠內(nèi)。分別給大鼠飼喂低鐵、中鐵、高鐵飼料，飲用去離子水，并每天給予光照12h/2h的飼養(yǎng)條件。飼喂35d后，采大鼠血作血紅蛋白及血清含鐵量測(cè)定，隨后頸椎脫臼處死動(dòng)物。造模前后在預(yù)定時(shí)間內(nèi)分別測(cè)定各組大鼠體重增長(zhǎng)情況。

(2)模型特點(diǎn)  用制備的除鐵飼料喂養(yǎng)35d后，低鐵組大鼠平均體重日增量小于中鐵組與高鐵組(分別為2.61g/ d，3.24g/d，3.24g/d)，低鐵組大鼠血清Hb、Fe測(cè)定值均達(dá)到貧血水平(<100g/L)；低、中、高鐵組大鼠的Hb與血清鐵水平區(qū)分良好，能分別滿足缺鐵性貧血，缺鐵但不貧血及正常水平三種實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ鸵?。模型大鼠缺鐵性貧血指標(biāo)的測(cè)定結(jié)果，與以往采用低鐵飼料輔以定期少量放血制備的缺鐵性貧血模型的研究報(bào)道一致。

(3)比較醫(yī)學(xué)  采用本方法建立的缺鐵性貧血模型與以往研究報(bào)道的缺鐵性貧血?jiǎng)游锬Ｐ?，在造模方法上并不一致。是由于飼料缺鐵所造成的。本模型制備方法降低大鼠血清鐵、Hb的速度快、效果可靠。用本法建立缺鐵性貧血?jiǎng)游锬Ｐ偷年P(guān)鍵是飼料中除鐵的處理過程，由于 EDTA-2Na能與Fe3+及Fe2+形成穩(wěn)定性*的絡(luò)合物，所以飼料除鐵處理過程中用EDTA-2Na浸泡除鐵是有效的。同時(shí)為避免飼料中其他離子的損失而調(diào)節(jié)浸泡液pH值為1～2，這時(shí)其他離子的絡(luò)合力可大大降低。本模型所用的飼料除Fe3+缺乏外，其他離子則由混合鹽中加入，其含量符合大鼠營(yíng)養(yǎng)學(xué)要求；造模結(jié)束后測(cè)定各組大鼠血清Cu與 Zn水平，缺鐵組與中、高鐵組測(cè)定值無顯著差異。配制低鐵飼料過程中關(guān)鍵的問題是防止鐵的污染，本模型制備方法所摸索出的小型塑料袋浸泡法加浸出液總鐵簡(jiǎn)易測(cè)定法，對(duì)防止飼料鐵污染及指示浸泡過程的結(jié)束既簡(jiǎn)單又實(shí)用有效。缺鐵性貧血模型復(fù)制過程中低鐵飼料的配制，目前國(guó)內(nèi)外普遍參考AOAC配方。但由于國(guó)內(nèi)因飼料原料精度不夠的限制，配制出來的低鐵飼料難以達(dá)到造模要求，因此建立缺鐵性貧血?jiǎng)游锬Ｐ蜁r(shí)常需輔以定期放血、溶血等輔助手段，使模型動(dòng)物出現(xiàn)血容量減少、溶血等現(xiàn)象，干擾造模結(jié)果的評(píng)價(jià)。本模型采用的去除飼料組分中含鐵量的方法，簡(jiǎn)便實(shí)用，同樣可獲得理想的模型制作效果。